1. 取樣前準(zhǔn)備工作
1.1 依據(jù)檢測區(qū)域的取樣點數(shù)，按照《培養(yǎng)基配制、滅菌標(biāo)準(zhǔn)操作程序》制備適量的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
1.2 在超凈工作臺內(nèi)，以無菌操作法將配制好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15mL的裝量分裝，待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū)。
1.3 將制備的營養(yǎng)瓊脂平皿倒置于隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30～35℃培養(yǎng)48小時。取出逐個檢查，確認(rèn)無菌落數(shù)后即可使用。
1.4 采樣：將上述制備好的營養(yǎng)瓊脂平皿交與QA人員取樣。

2. 儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基

2.1 所用的儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基
2.1.2 浮游菌采樣器
2.1.3 培養(yǎng)皿（φ90mm×15mm）
2.1.4 培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）
2.1.5 恒溫培養(yǎng)箱

2.2  儀器、設(shè)備、培養(yǎng)基的要求
浮游菌采樣器
2.2.1 浮游菌采樣器須要有流量計和定時器。
2.2.2 應(yīng)嚴(yán)格按儀器說明書的要求進(jìn)行操作。
2.2.3 采樣器須按儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定，以保證測試數(shù)據(jù)的可靠性，檢驗項目有：定時器，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速，流量計。
2.2.4 每次測試前應(yīng)先接通電源，啟動真空抽氣泵，然后調(diào)節(jié)流量計和定時器。
2.2.5 空氣采樣量根據(jù)需要選定，已知采樣器的流量（L/min）,設(shè)定采樣時間（min）兩者相乘即得采樣量（L）。
2.2.6 采樣口須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造，采樣管嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑，采樣管的長度應(yīng)根據(jù)測定點的高度定，盡量減少彎曲。

3. 測試方法

3.1  測試用儀器、培養(yǎng)皿表面須嚴(yán)格消毒。
3.1.1  采樣器進(jìn)入被測房間前先用消毒劑滅菌。
3.1.2  用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
3.1.3  采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂盤、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。
3.1.4  采樣口及采樣管使用前須高溫滅菌，如用消毒劑對采樣管的外壁、內(nèi)壁進(jìn)行消毒，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。
3.1.5  采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。

3.2  采樣程序
3.2.1  儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動真空泵抽氣，使儀器的殘余消毒劑蒸發(fā)，時間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。
3.2.2  關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣品縫隙高度。
3.2.3  置采樣器于采樣點后，開啟采樣器、轉(zhuǎn)動定時器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間。

4. 測試規(guī)則

4.1 測試狀態(tài)
4.1.1  浮游菌測試前微生物限度檢查室已經(jīng)消毒過。
4.1.2  測試狀態(tài)為靜態(tài)測試，并在報告中注明測試狀態(tài)。

4.2 測試人員
4.2.1  測試人員須穿戴符和被測環(huán)境級別的工作服。
4.2.2  靜態(tài)測試時，室內(nèi)人員不得多于2人。

4.3 測試時間
4.3.1  對單向流，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10min后開始。
4.3.2  對非單向流，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30min后開始。

4.4.1  工作區(qū)測點位置離地0.8m～1.5m左右，送風(fēng)口測點位置離開送風(fēng)面30cm左右；可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點。
4.4.2  每個采樣點一般采樣一次。
4.4.3  對于單向流或送風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對氣流方向；對于非單向流，采樣管口向上。
4.4.4  布置采樣點時，至少應(yīng)離開塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上。
4.4.5  采樣時，測試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)。

5. 培養(yǎng)
取樣結(jié)束后將平皿復(fù)倒置隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30～35℃培養(yǎng)48小時。并以未采樣的營養(yǎng)瓊脂平皿作對照皿。

6. 菌落計數(shù)

6.1 用肉眼直接計數(shù)，然后用5-10倍放大鏡檢查，是否遺漏。
6.2 若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時，仍以2個或2個以上的菌落計數(shù)。計數(shù)：培養(yǎng)結(jié)束，將上述培養(yǎng)后的平皿取出，逐個點計菌落數(shù)，必要時用放大鏡檢查，并記錄。

7. 結(jié)果計算
式中：m 為該房間（或區(qū)域）的平均菌落數(shù)；
          m1、m2‥‥‥mn 為該房間（或區(qū)域）各取樣點的菌落數(shù)；
          N 為培養(yǎng)皿總數(shù)。

8. 結(jié)論

8.1 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標(biāo)準(zhǔn)。
8.2 若某潔凈室（區(qū)）的平均菌落數(shù)超過評定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對此區(qū)域先行消毒，然后重新測試兩次，測試結(jié)果必須合格。